称呼：

pNTAP-B载体

目次号 IPD8339

质粒类型：哺乳动物抒发载体

开动子：CMV

克隆体式：多克隆位点，逼迫性内切酶

载体大小：4531 bp

载体标签：streptavidin-binding peptides，calmodulin-binding peptides

载体抗性：Kanamycin (卡那霉素)

筛选标识：Neomycin (新霉素)

使用体式

质粒溶化：

从-20℃雪柜中取出质粒干粉，5000×g离心5分钟。

仔细洞开管子，加入20 μl无菌水溶化DNA。

关闭管子，室温孵育10分钟。

顷然涡旋，然后快速离心，使液体汇注在管底。

将质粒存储在-20℃。

滚动感受态细胞：

取100 μl感受态细胞，冰浴10分钟。

加入2 μl质粒，冰浴30分钟。

42℃热激60秒，不搅动，然后冰浴2分钟。

加入900 μl不含抗生素的LB液体培养基，37℃摇床220 rpm培养45分钟（或30℃培养1-1.5小时）。

6000 rpm离心5分钟，留100 μl上清重悬菌体千里淀，涂布在含有相应抗生素的LB平板上。

回转平板，37℃培养14小时，或30℃培养20小时。

挑取单克隆菌落，加入含有相应抗生素的LB液体培养基🦄九游娱乐(China)官方网站，220 rpm培养14小时，左证明际需要索取质粒。